中文名:RNAse A溶液(10mg/ml)

 

英文名:RNAse A solution(10mg/ml)

 

保存溶液：10mM乙酸钠，50mM Tris-HCl pH7.4

 

DNase and Proteinase： Free

 

储存条件:-20°C

 

保存时间 ：2年

 

 

产品简介：

 

核糖核酸酶A（Ribonuclease A，RNase A），简称RNase A。来源于牛胰，一种含4个二硫键的单链多肽，分子量约为13.7 kDa。

 

作为一种核糖核酸内切酶（endoribonuclease），特异性降解单链RNA上的胞嘧啶（C）或尿嘧啶（U）残基。具体来说，切割识别

 

的是由某核苷酸上的5’-核糖和相邻的嘧啶类核苷酸3’-核糖上磷酸基团形成的磷酸二酯键，从而使得2’,3’-环磷酸水解为对应的3’-核苷磷酸

 

（比如，pG-pG-pC-pA-pG经RNase A切割产生pG-pG-pCp 和A-pG）。

 

核糖核酸酶A（RNase A）最常见的实验应用，是在提取质粒DNA或基因组DNA过程中，去除RNA。因此制备过程中DNase酶活性的存在

 

与否是需要重视的污染之一。本试剂已经水浴煮沸灭活DNase。本试剂还可用于RNA酶保护分析、RNA序列分析等分子生物学实验。

 

本试剂以溶液形式提供，浓度为10 mg/mL。推荐工作浓度为1-100 ug/mL，因应用类型的不同而异。

 

 

使用方法：

 

本产品为10mg/mL的RNase A溶液，不含DNase 和蛋白酶活性，可以用于基因组DNA以及质粒提取过程中RNA的降解，也可用于

 

蛋白纯化中RNA污染的去除。

 

 

质粒提取中RNaseA的使用：

 

RNaseA在质粒中的终浓度推荐为100μg/mL，即在质粒溶液中按照1/100体积加入10mg/mL RNaseA即可，如50μL质粒中加入0.5μL

 

RNaseA溶液，37℃孵育10分钟。亦可将10mg/mL RNase A溶液按照每mL质粒提取溶液I加入约20μL RNase A溶液，充分悬浮菌体后

 

37℃孵育10分钟，直接进行质粒提取实验。