中文名称：RIPA裂解液(组织/细胞)  

英文名称：RIPA cell lysis buffer

保存条件：4℃

保质期：1年

 

产品简介

 

RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的PAGE、Western、免疫沉淀(immunol precipitation，IP)、免疫共沉淀(co-IP)和ELISA等。

 RIPA 组织/细胞裂解液是利用表面活性剂等来裂解细胞膜（包括核膜）。本试剂提取的蛋白为可溶性总蛋白。

 本产品可以用于动物、植物的细胞或组织样品，也可以用于真菌或细菌样品。

 RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。RIPA裂解液的配方有很多种，根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。

 本品为中型，RIPA裂解液(中)的主要成分为 Tris(pH 7.4)， NaCl，NP-40和sodium deoxycholate。

 如发现RIPA有沉淀，请放室温半小时或者40度水浴使沉淀溶解。

 

本品不含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂。根据使用量，取每1ml RIPA 加入10ul 蛋白酶抑制剂，混匀备用 （现用现加）。

 

1、样品前处理： 

a)对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 ul裂解液的比例

 加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。

 

b)对于悬浮细胞：离心收集细胞，按照6孔板每孔细胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液，用手指轻弹悬浮细胞以充分裂解。 

充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成 5-10×105细胞/管，然后再裂解。

 

c)对于组织样品：把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液

(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量) 。

 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。

 

2、后处理：

将裂解后的样品10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。