注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

锰过氧化物酶（EC1.11.1.13）是一种含亚铁血红素的过氧化物酶，主要存在于担子菌中，属于木质素降解酶系，能有效的降解木质素及废水和土壤中比较难降解的氯化物，叠氮化合物、DTT，多环芳烃等。

测定原理

锰过氧化物酶在Mn2+存在的条件下，将愈创木酚氧化为四邻甲氧基连酚，在465nm有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、震荡仪、甲苯。

试剂组成和配制

试剂一：液体30mL×1瓶，4℃保存。

试剂二：液体5mL×1瓶，4℃保存。

试剂三：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。

试剂四：液体5mL×1瓶，4℃保存。

样品处理

新鲜土样风干，过30-50目筛。

测定操作

	对照管	测定管
土样（g）	0.1	0.1
甲苯（μL）	50	50
25℃，静置15min
试剂一（μL）	700	600
试剂二（μL）		100
试剂三（μL）	200	200
试剂四（μL）	100	100
充分混匀，于30℃震荡反应3h，于10000rpm，4℃离心10min，取800μL于1mL玻璃比色皿，测定465nm处吸光值，记为A对照管和A测定管，△A=A测定管- A对照管

酶活计算公式

酶活性定义：每克土壤每分钟氧化1nmol愈创木酚所需的酶量为一个酶活力单位。

S-MnP活性（nmol/min/g 土样）= ×V反总÷W÷T= 8.3×△A÷W

ε：愈创木酚摩尔消光系数：12100L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应总体积，1mL；W：样本质量，g；T：反应时间，10min