pCantab 5E载体基本信息:
载体名称:pCantab 5E, pCantab5E, pCantab-5E
质粒类型:重组噬菌体抗体系统, 噬菌体展示系统
高拷贝/低拷贝:低拷贝
启动子:Lac
克隆方法:多克隆位点,限制性内切酶
载体大小:4522 bp
5' 测序引物及序列:pCantab5-R1: ccatgattacgccaagctttggagcc
3' 测序引物及序列:pCantab5-R2: cgatctaaagttttgtcgtctttcc
出品公司:Amersham
载体抗性:氨苄
备注:由噬菌体展示系统发展而来。
病毒/非病毒:非病毒
本载体在SfiI和NotI之间连入了ScFv,为pCANTAB 5E的酶切位点,客户可使用SfiI和NotI酶将连入的片段切掉,然后连入客户需要克隆的片段即可。
本载体,一般情况以菌液形式提供,质粒是在菌体里,首先要扩大培养(氨苄抗性),然后提质粒(低拷贝),获得了大量质粒之后再进行后续操作。
转化菌株是XL2 blue,菌株本身带有氯霉素和四环素抗性,含质粒的菌株直接可以划线--摇菌培养后提取质粒。菌株XL2-Blue使用LB培养基,在37℃有氧的环境下培
养,然后使用20%的甘油保藏菌种,42℃热激处理可将质粒成功转入XL2-Blue中。
培养含有pCantab 5E的XL2-Blue菌体,培养基只加Amp抗生素即可,除了制备感受态,其他情况下都没有必要添加菌株自带的抗生素。