5×非还原蛋白上样缓冲液
名称:5×非还原蛋白上样缓冲液(不含DTT, 巯基乙醇)
英文名称:5×Protein Loading Buffer (without DTT or β-ME)
目录号:QYR048
规格:10ml
保存条件:-20℃
保质期:2年
溶液成分:由甘油,Tris-HCl, SDS, 溴酚蓝等成分组成。
产品描述:
5×非还原蛋白上样缓冲液(不含DTT,巯基乙醇)适用于非还原SDS-PAGE电泳时蛋白质上样用。SDS可与蛋白结合,蛋白-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种蛋白本身电荷的差异。SDS还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白分子的二级和三级结构最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚基),电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳指示剂,可大概指示电泳结束的时间。有的抗体仅仅识别非还原形式的蛋白,如氧化形式(特别是半胱氨酸残基)的蛋白,此时上样缓冲液和电泳缓冲液中不能含有还原剂。
使用说明:
1、每40微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液(5倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高,可用双蒸水稀释。
2、混匀后,100℃水浴加热5-10分钟,使蛋白变性。
3、冷却至室温后,10000-14000rpm离心2-5分钟,取上清直接上样电泳即可。
注意事项:
1、聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右, 胶浓度为12%时,约在20kd左右,胶浓度为15%时,大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
2、本试剂有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂,PH值受保存温度影响,在低温冻存状态下,溶液可能会呈现深棕色,不影响产品使用。