中文名:0.1M 亚精胺溶液（过滤除菌）

英文名:0.1M Spermidine solution

储存条件:2-8℃

产品简介

 0.1M 亚精胺溶液（过滤除菌），为客户下单之后新鲜配置的无菌溶液。氯化钙溶液(2.5mol/L,无菌)，为经过过滤之后高压灭菌的无菌溶液。

 一般此浓度的亚精胺和氯化钙用于基因枪转化法转基因实验。亦可用于其他实验的高浓度储备液。

操作步骤：

1. 在进行实验前，至少培养样品 30 天，这样确能保叶片大于 5×6 cm2。

2. 根据以下步骤制备 DNA-金粉混合液：

a. 将金粉微粒中加入充足的无菌蒸馏水。

b. 使用 100％乙醇对金粉微粒进行三次洗涤并弃去浮层。

c. 加蒸馏水使金粉微粒重新悬浮。

d. 将准备好的 DNA 溶液（1μg/μl）添加到金粉微粒溶液中，形成浓度为 1μg DNA / 0.6mg 金粉微粒悬浊液。

e. 剧烈摇晃微离心管使得样品混合均匀。

f. 滴入适当体积的 0.1M 亚精胺和 2.5M CaCl2 进入试管，同时不断剧烈地摇晃。

g. 继续摇晃一分钟以上。

h. 用 100％EtOH 进行三次洗涤，并弃去浮层。

i. 重新使 DNA 包裹的金粒子悬浮于 100%的 EtOH 中。

3. 按照说明书中要求的，讲 UTS-10 安装到 GDS-80 系统上，并设置 40-50 psi 的传递压力。

4. 调整距离量尺至 6-8 cm 的传递距离。

5. 把四爪叶片夹夹到目标叶上，用手调螺栓将其拧紧固定。

6. 将等分 10μl DNA 混匀悬浊液倒入样品装载孔中。

7. 对叶片标本进行轰击。

8. 培育植株三天以上，通过使用 CRi MaestroTM 的体内成像系统观察荧光结果。