名称：Pig IgG-琼脂糖凝胶
英文名称：Pig IgG Agarose
目录号：QYP1057
规格：1ml
储存形式：1ml（包含0.5ml Pig IgG-琼脂糖凝胶和0.5ml保护液）

产品介绍
Pig IgG-琼脂糖凝胶是Pig IgG与琼脂糖凝胶（Agarose）偶联，制备的抗原亲和层析介质。本品适用于IP实验、抗体纯化，包括各物种使用Pig IgG免疫产生的anti-Pig抗体的纯化和检测。本品结构稳定，结合IgG效率高，对反应体系pH值要求不严格，允许在pH5.0-8.0之间进行结合。

产品性能

性能	指标
基质	6%琼脂糖微球
配基	Pig IgG
配基密度	≥7mg Pig IgG/ml 琼脂糖微球
载量	7-10mg IgG/ml 琼脂糖微球
粒径	45-165μm
推荐流速/最大流速	100/750 cm/h
pH稳定范围-工作/清洗	3~9/2~10
储存缓冲液	PBS+20%乙醇
储存温度	4℃
保质期	1年

IP实验流程
试剂及耗材准备
IP缓冲液：25mM Tris, 150mM NaCl, pH7.2
洗脱缓冲液：100mM Glycine, pH2.7
中和缓冲液：1M Tris-HCl, pH9.0

实验方案
本实验方案使用50ul Pig IgG-琼脂糖凝胶（100ul Pig IgG-琼脂糖凝胶混悬液），可结合50-300ug anti-Pig抗体。具体操作中，可根据抗原、抗体的加样量及抗原与抗体的结合能力，调整所使用的凝胶、IP缓冲液、洗脱缓冲液体积。
1.在1.5ml离心管中加入50-1000ul含抗原的样本，加入一定浓度的抗体。4℃孵育过夜。
2.在新的离心管中加入100ul Pig IgG-琼脂糖凝胶混悬液，1000g，4℃离心5min，弃上清。
3.向Pig IgG-琼脂糖凝胶中加入0.5ml IP缓冲液，用上述条件离心，弃上清。重复2次。
4.将抗原-抗体复合物加入Pig IgG-琼脂糖凝胶中，室温旋转孵育2h。
5.将孵育好的琼脂糖凝胶-抗体-抗原复合物用上述条件离心，弃上清。
6.加入0.5ml IP缓冲液，用上述条件离心，弃上清。重复3-4次。
7加入50ul洗脱缓冲液，室温孵育5min。用上述条件离心，收集上清。重复1次。
8.合并两次离心收集的上清，加入10ul中和缓冲液，将pH调整至7.0左右。
9.SDS-PAGE电泳检测目的蛋白。或将目的蛋白进行透析，供其他实验使用。

替代方案：用0.5ml 蒸馏水洗涤琼脂糖凝胶-抗体-抗原复合物，用上述条件离心，弃上清。向琼脂糖凝胶-免疫复合物中加入蛋白上样缓冲液，95℃加热5min。离心收集上清，SDS-PAGE电泳检测目的蛋白。